PRACA ORYGINALNA
Ocena wiarygodności oznaczania niektórych typów swoistości przeciwciał przeciwjądrowych
Więcej
Ukryj
Data publikacji online: 08-04-2010
Reumatologia 2009;47(6):311-318
SŁOWA KLUCZOWE
STRESZCZENIE
Zasadniczym problemem w serodiagnostyce autoprzeciwciał są sytuacje, w których przy wysoko dodatnich mianach ANA nie można ustalić swoistości autoprzeciwciał lub, co gorsza, typ „świecenia” ANA częściowo lub kompletnie nie zgadza się ze swoistościami oznaczonymi testami w tych surowicach. Tego typu rozbieżności dotyczą ok. 5–10% surowic.
Wyjaśnienie tego typu sytuacji jest celem niniejszej pracy.
Porównano 4 metody oznaczania przeciwciał anty-dsDNA, uzyskując zaledwie ok. 45% zgodności jakościowej. Analiza „wrażliwości” porównywanych testów ELISA, a także testu ANA-IIF-Hep-2, wykonana testem neutralizacji preparatami dsDNA, ssDNA i RNA, wykazała obniżenie poziomów przeciwciał anty-dsDNA oznaczanych w tych testach do wartości ujemnych. Miareczkowanie dawek anty-genów użytych do neutralizacji nie wykazało różnic w dawce niezbędnej do neutralizacji dla dsDNA i ssDNA i tylko neutralizujące dawki RNA były o rząd wielkości wyższe. Ten niespodziewany wynik spowodował konieczność sprawdzenia swoistości oraz awidności przeciwciał eluowanych metodą affinity. Niezależnie od antygenu, z którego eluowano przeciwciała, wykazywały one reaktywność z pozostałymi antygenami, np. przeciwciała eluowane z NC (związanej z ssDNA) reagowały także z dsDNA i kardiolipiną i były to przeciwciała o niskim indeksie awidności.
Podsumowując, należy stwierdzić, że struktura i stabilność dsDNA (skutkująca obecnością fragmentów jednoniciowych) wyklucza prostą możliwość ustalenia swoistości poszczególnych pól przeciwciał anty-DNA i konieczne jest przy oznaczaniu poziomów przeciwciał dla dsDNA oznaczenie ich powinowactwa/awidności. Rozstrzygnięcie mogłyby przynieść planowane badania na syntetycznych analogach DNA, np. polinukleozydach.
REFERENCJE (24)
1.
von Műhlen CA, Tan EM. Autoantibodies in the diagnosis of systemic rheumatic diseases. Semin Arthritis Rheum 1995; 24: 323-358. .
2.
Tan EM. Autoantibodies to nuclear antigens (ANA): Their immunobiology and medicine. Adv Immunol 1982; 33: 167-240. .
3.
Ząbek J, Palacz A, Musiej-Nowakowska E i wsp. Porównanie wartości diagnostycznej przeciwciał dla nukleosomów z innymi markerami serologicznymi występującymi w toczniu rumieniowatym układowym. Reumatologia 2004; 42: 507-514. .
4.
Kadłubowski M, Jackson M, Yap PL, et al. Lack of specificity for antibodies to double stranded DNA found in four commercial kits. J Clin Pathol 1991; 44: 246-250. .
5.
Hamann D, Smeenk RJT. dsDNA autoantibodies. Autoantibodies. Elsevier, B.V. 2007; 159-167. .
6.
Stollar BD. Immunochemistry of DNA. Int Rev Immunol 1989; 5: 1-22. .
7.
Haugbro JC, Nossent T, Winkler Y, et al. Anti-dsDNA antibodies and disease classification in antinuclear antibody positive patients: the role of analytical diversity. Ann Rheum Dis 2004; 63: 386-394. .
8.
DNA – budowa i właściwości. W: Genetyka molekularna. Węgleński P (red.). PWN, Warszawa 1995; 37-44. .
9.
van Venrooij WJ. Autoantigens in connective tissue diseases. Immunology of the connective tissue diseases, ed. GS Panayi. Kluwer Academic Publisher. Dordrecht, Boston, London 1994; 22: 305-334. .
10.
Ząbek J. Standaryzacja metod oznaczania autoprzeciwciał markerowych w ramach ECSA – cele a realne efekty. Reumatologia 2005; 43: 179-182. .
11.
Maśliński W, Ząbek J, Brzosko M, et al. Standarization of marker autoantibodies in systemic connective tissue diseases. Cent Eur J Immunol 2008; 33: 33. .
12.
Maśliński W, Ząbek J, Brzosko M. Standaryzacja w reumatologii. II Sympozjum Standaryzacja w Immunologii. VI Konferencja Naukowo-Szkoleniowa Postępy Immunopatologii w Diagnostyce Klinicznej. Poznań, 27-29 listopada 2008 (materiały Konferencji). .
13.
Thomas HI, Morgan-Capner P, Anders G, et al. Persistence of specific IgM and low avidity specific IgG1 following primary rubella. J Virol Methods 1992; 39: 149-155. .
14.
Gershoni JM, Poladi GE. Protein blotting: principles and applications. Anal Biochem 1983; 131: 1-34. .
15.
Rekvig OP. The immunological basis for selecting anti-dsDNA antibody assays. Glias J 2002; 1: 3-6. .
16.
Ząbek J. Przeciwciała antyfosfolipidowe. W: Reumatologia kliniczna. Zimmermann-Górska I (red.). Wydawnictwo Lekarskie PZWL, Warszawa 2008; 201-206. .
17.
Kandiah DA, Krilis SA. Immunology and methods of detection of antiphospholipid antibodies. In: The Antiphospholipid Syndrome. Asherson RA, Cervera R, Piette J-Ch, Shoenfeld Y (eds). CRC Press, Boca Raton, New York, London, Tokyo 1996; 29-47. .
18.
Ząbek J, Pyka J, Krzewska I, et al. Autoantibodies in systemie lupus erythematosus (SLE). Ann Univ Mariae Curie-Skłodowska Lublin – Polonia 2008; 63: 18-24. .
19.
Forger F, Matthias T, Oppermann M, et al. Clinical significance of anti-dsDNA antibody isotypes: IgG/IgM ratio of anti-dsDNA antibodies as a prognostic marker for lupus nephritis. Lupus 2004; 13: 36-44. .
20.
Somerfield SD, Roberts MW, Booth RJ. Double-stranded DNA antibodies: a comparison of four methods of detection. J Clin Pathol 1981; 34: 1032-1035. .
21.
Raz E, Brezis M, Rosenmann E, Eilat D. Anti-DNA antibodies bind directly to renal antigens and induce kidney dysfunction in the isolated perfused rat kidney. J Immunol 1989; 142: 3076-3082. .
22.
Poreplikacyjna naprawa przez wycinanie niewłaściwie sparowanych zasad. W: Genetyka molekularna. Węgleński P (red.). PWN, Warszawa 1995; 252-254. .
23.
Bruggen MC, Walgreen B, Rilke T, et al. Antigen specificity of antinuclear antibodies complexed to nucleosomes determines glomerular basement membrane binding in vivo. Eur J Immunol 1997; 27: 1564-1569. .
24.
Bożič B, Čučnik S, Kveder T, et al. Affinity and avidity of autoantibodies. Autoantibodies. Elsevier BV. 2007; 21-28.
Copyright: © Narodowy Instytut Geriatrii, Reumatologii i Rehabilitacji w Warszawie. This is an Open Access journal, all articles are distributed under the terms of the Creative Commons Attribution-NonCommercial-ShareAlike 4.0 International (CC BY-NC-SA 4.0) License (
https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/), allowing third parties to copy and redistribute the material in any medium or format and to remix, transform, and build upon the material, provided the original work is properly cited and states its license.